AtFBX92 的过度表达导致植物的叶子比野生型小，而AtFBX92水平降低的植物则通过刺激细胞增殖而增加叶片生长。详细的细胞分析表明，AtFBX92 特别影响早期叶片发育过程中的细胞分裂速率。

AtFBX92水平降低的植物中几个细胞周期基因表达水平的增加支持了这一点。而玉米同源基因 ZmFBX92 在玉米中的过表达对植物生长没有影响，而拟南芥中的异位表达增加了叶子的生长。

截断形式的 AtFBX92 的表达表明，ZmFBX92和AtFBX92在拟南芥中功能增益的对比效应是由于ZmFBX92基因中缺少F-box相关结构域。我们的工作揭示了复杂网络中的另一个参与者，它决定了叶子的大小并为识别假定的底物奠定了基础。

ZmFBX92OE和WT植物的表型分析显示，转基因植物的叶面积显著较大，其他表型正常（图1）。在标准和轻度渗透胁迫条件下体外生长的WT和ZmFBX92OE植株的预计花环面积（PRA）在分层后6天至21天（DAS）确定（图1A）。

平均而言，胁迫在21 DAS 时使花环面积减少了约 60%。在两种条件下，ZmFBX92OE 植物与WT相比具有显著增加的花环面积（图1A）。ZmFBX92OE 对拟南芥叶片大小的积极影响通过确定22 DAS时的单个叶面积得到证实（图1B、C）。ZmFBX92OE 植物的成熟叶和幼叶都较大。

为了检查细胞增殖和/或细胞扩增的差异在多大程度上导致叶片尺寸增加，在WT和ZmFBX92OE叶片中比较了背面表皮细胞的数量和尺寸。ZmFBX92OE 植物中完全成熟（22DAS）的第三片叶子由于细胞数量的高度增加（约70%）而增大了约30%，这部分被细胞大小减少约20%（图1D）所补偿。因此，ZmFBX92 在拟南芥中的异位表达导致叶片变大，主要是由于细胞数量增加。

与异位表达ZmFBX92的植物所观察到的相反，与WT植物相比，AtFBX92OE 植物的花环面积减少（图 2A）。这种减少在轻度渗透胁迫下相当。在AtFBX92OE植物中没有观察到其他明显的表型。从6个DAS开始，在发育的早期就已经可以看到减小的花环大小（图 2A）。

AtFBX92过表达对叶生长的负面影响通过测定体外生长的 22 天龄植物的单个叶面积得到证实。与WT相比，AtFBX92OE7植物的成熟叶面积显著较小，而对于AtFBX92OE2 植物，所有叶子都显著较小，包括幼叶（图2B、C）。

为了探索叶片尺寸减小的细胞基础，在细胞水平上分析了体外生长的 AtFBX92OE 和WT植物的叶片发育。与ZmFBX92OE的情况类似，第三片叶子背面表皮的细胞数量和细胞大小在21 DAS时确定，此时这片叶子完全成熟（图2D）。AtFBX92OE2和AtFBX92OE7的成熟第三叶分别比WT小45%和16%，这是由于细胞数量大幅减少，部分补偿通过增加的单元尺寸。

图1.（左图）ZmFBX92表达对拟南芥花环和叶片生长的影响以及叶片大小差异的细胞基础

图2.（右图）在标准体外条件下AtFBX92异位表达对花环和叶片生长的影响以及叶片大小差异的细胞基础

图3.（左图）体外标准条件下AtFBX92 下调对花环和叶片生长的影响以及叶片大小差异的细胞基础
图4.（右图）体外标准条件下AtFBX92del 表达对花环和叶片生长的影响以及叶片大小差异的细胞基础

与过度表达AtFBX92的植物平行，通过使用以下工具设计靶向AtFBX92的人microRNA（amiRNA），产生表达水平降低的转基因植物。对三个表达水平降低的纯合、独立、单基因座系的叶片表型进行了分析，由于它们非常相似，因此仅给出了amiFBX92-4（以下称为amiFBX92）的结果（图3。从DAS的第5天到第21天测定PRA，并显示amiFBX92中的PRA比分析第一天起的WT更大（图3A）。

在轻度渗透胁迫下，PRA的增加具有可比性。接下来，在21 DAS测定单个叶面积。除amiFBX92的叶片3外，所有叶片均显著大于WT的叶片（图3B，C）。21 DAS时完全成熟的第一对叶的细胞分析表明，叶面积的（24%）是由于细胞数量增加（47%），部分由细胞大小减小（16%）补偿（图3D）。综上所述，我们的数据表明改变AtFBX92表达水平以相反的方式影响叶片大小，这主要是细胞数量差异的结果。