肿瘤生物治疗的新思路——异体淋巴细胞局部移植

异体淋巴细胞移植引发的“移植物抗宿主反应”（GVHR）是最强的免疫攻击力。由GVHR激发宿主产生的排异反应也是最强的综合性的（包括抗肿瘤）免疫反应。

异体淋巴细胞可以全面激活宿主的免疫排斥（包括抗肿瘤）反应。只要在肿瘤局部注射异体淋巴细胞，就可最大限度保护宿主正常细胞，并可利用肿瘤抗原参与激活这种“免疫排斥抗肿瘤反应”。

异体自体(同基因)淋巴细胞对肝癌移植瘤的治疗作用
目的 用供者异体淋巴细胞(HL)在受者荷瘤组织局部注射,以激发受者抗肿瘤免疫反应,再用受者自体淋巴细胞(AL)局部注射治疗肿瘤;比较用活HL与用灭活HL进行局部注射免疫的抗肿瘤效果.
方法 手术暴露受鼠(CB6F1小鼠)肝脏,用眼科镊刺入潜行分离出肝包膜和肝实质间隙,将肝细胞癌Hepa1-6(4×106/0.1mL)注射接种到肝实质内;用1mol/L NaOH将20g/L胶原溶液pH值调为7.4,立即注入瘤细胞接种点肝包膜下间隙,待胶原溶液在肝包膜下变成凝胶,形成一人工囊腔;将小鼠腹壁切口肌层缝合于两边皮下组织,使人工囊腔的肝包膜面贴在皮下,缝合皮肤关腹.此为荷瘤受鼠.CB6F1 H-2~(b/d)小鼠和CC3HF1H-2~(d/k)小鼠具有半相合MHC.接种瘤细胞3d后,取供鼠(CC3HF1小鼠)脾淋巴细胞(HL),制成HL悬液(含HL 3×10~7/0.2mL,月桂氮卓酮5mg/0.2mL)和IHL悬液(用丝裂霉素灭活HL成为IHL,含IHL 3×10~7/0.2mL,月桂氮卓酮5mg/0.2mL),再随机取荷瘤受鼠,在腹壁切口缝合处经皮穿刺进入人工囊腔,注入HL悬液,IHL悬液或PBS,分别为A组,B组,C组(均为每组0.2mL).月桂氮卓酮可增加肝实质通透性,以利于淋巴细胞穿过.首次注射后6d各组同前法做第2次注射;注射后6d,从A,C组各随机取6只受鼠,其中2只用于计数CD8+T,NK细胞,测脾淋巴细胞杀瘤细胞率和血清IL-2,IFN-γ浓度;另外4只受鼠用于制备自体淋巴细胞(AL)悬液(含AL 9×107/0.2mL,月桂氮卓酮5mg/0.2mL),将AL悬液经皮注射到A,B组剩下的受鼠肝包膜下人工囊腔内(每鼠0.2mL,各组n=8);同时在C组受鼠人工囊腔内注射PBS(每鼠0.2mL,n=8).末次注射后12d处死受鼠,剥出肿瘤测瘤的长径(a)和与之垂直的宽径(b),计算肿瘤体积和抑瘤率.
结果 注射HL(或IHL)悬液后受鼠脾淋巴细胞杀瘤细胞率(效靶细胞比=60:1)比对照组高4.3倍,CD8~+T,NK细胞数均比对照组明显增高(均为P0.05).
结论 将HL(或IHL)注射到受者荷瘤肝实质表面可明显激发受者抗肿瘤免疫反应;用HL(或IHL),AL序贯局部注射可有效抑制肿瘤生长;用HL悬液免疫的抗瘤效果比用IHL悬液免疫的抗瘤效果好,但差异不明显.
关键词：异体淋巴细胞；自体淋巴细胞；局部注射；肝包膜下；免疫；肝癌
会议名称：第九届全国疑难及重症肝病大会

　 2025 美国临床肿瘤学会报道：TIL细胞疗法最新进展，100%控制率+5年生存双达标，亮剑肺癌/宫颈癌等多癌种
　　肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)疗法是一类极具前景的过继细胞疗法(ACT)，在实体瘤治疗中展现显著潜力，其单药与联合方案已为患者带来持久临床缓解及生存获益。尤其在晚期黑色素瘤领域，TIL疗法疗效获最新研究证实，不仅是重要治疗方向，更被纳入2024年NCCN指南，成为该病症首选二线方案。
　　近期，《实验血液学与肿瘤学》发表报告，总结2025年ASCO(美国临床肿瘤学会)大会上，实体瘤TIL疗法最新动态，包括单药/联合疗法疗效数据、技术创新及多癌种应用探索。
本法将异体淋巴细胞注射到肿瘤局部，可吸引患者（宿主）淋巴细胞浸润到肿瘤组织内。由此可加强TIL疗法的疗效。

　　异体淋巴细胞和自体淋巴细胞序贯局部注射抗肿瘤法
　　异体淋巴细胞（HL）可用医院血库或血站单采机获取的健康供者白细胞（即临床用于成分输血的浓缩白细胞）。自体淋巴细胞（AL）就是患者自己静脉用血库的白细胞单采机分离的浓缩白细胞。制备的白细胞无需特殊处理，调整浓度后可直接注射。价廉、安全、方便。用单采机一次可处理几升血液，可获得高达1.5-3.0×10^10白细胞（包括粒细胞和淋巴细胞）。
　　首轮治疗：第一步注射，用单采机分离或手工分离健康人浓缩白细胞（作为异体淋巴细胞HL），立即用正常人血浆稀释成白细胞悬液（白细胞密度1-3×10^10/10ml）。首日取白细胞悬液10ml在B超引导下经皮穿刺到患者病变部位（瘤灶及周边组织或脏器）多点注射。瘤灶内注射法：先向瘤灶组织内注射5ml白细胞悬液，再边退针边注射将其余5ml注入整条穿刺道内至皮下。次日和第三日分别以不同方位和进针角度同法向上述病变部位及穿刺道内注射。10天后再按照同法注射3天。可根据患者反应和耐受程度调整白细胞数和天数。末次注射后10天开始第二步注射，用同法从患者静脉血分离患者自体白细胞，用正常人血浆调整白细胞密度至3×10^10/10ml，制成自体白细胞悬液。将自体白细胞悬液分成三份，同上法以三种不同进针角度进行自体注射（首日）。5天和10天后分别按首日法再注射一次。
　　首轮治疗后5-10天，可按同法进行第二轮治疗。而后，可按同法进行多轮注射。可根据患者耐受程度调整上述白细胞数和天数。原则上尽可能多注射白细胞。为了使输入的异体淋巴细胞能存活，可短期使用免疫抑制剂。比如，从注射前三天开始每日口服环孢素（6mg/kg/日）直至第三次注射后第二天停药。
　　本法创新点是用价廉安全的血库机采供者白细胞作异体淋巴细胞（HL），HL在局部激活浓集的宿主患者自体淋巴细胞（AL）。间歇地用HL在宿主局部刺激AL，通过适度的局部性移植物抗宿主反应（GVHE或GVHD）和宿主排异反应来抗肿瘤。也可通过血管介入从动脉插管将上述白细胞悬液注射到肿瘤部位
参考文献：
　　1.一种特殊的成分输血——供者淋巴细胞输注.中国输血杂志, 2002,15(2): 146-147。用血细胞分离机（或密度梯度离心分离）采集供者外周血淋巴细胞。供者淋巴细胞植入宿主体内，其中的T细胞在次要组织相容性抗原协同下，通过直接细胞接触产生异基因反应，这种反应虽然是异体抗原特异性而不是肿瘤细胞特异性，但这种反应可以攻击宿主体内的肿瘤细胞。
　　2.异体淋巴细胞和自体淋巴细胞序贯局部注射对小鼠肝癌移植瘤的治疗作用. 实用肿瘤学杂志,2018,32(6):493-497.
　　3.肝组织内序贯注射灭活异体淋巴细胞和自体淋巴细胞治疗小鼠肝癌移植瘤的研究.肝脏,2018,23(5):387-390.
本法价廉、安全、简便，可反复进行，或与其它疗法配合，以清除癌细胞。如果由血站制备异体淋巴细胞，就可做到标准化，常备供应。

老百姓真正用得起的疗法

治疗癌症的各种细胞疗法（比如肿瘤浸润淋巴细胞疗法，TIL）的疗效都与治疗次数有关，治疗次数越多疗效越好。但由于价格等原因，目前细胞疗法治疗次数都很有限。本文的“异体淋巴细胞（HL或iHL）肿瘤局部注射疗法“价廉、安全、方便，可反复多次进行，并可在体内诱导TIL（无需取淋巴细胞体外培养）。有望治愈癌症。

（本吧2025-10-25 10：54）福克斯最新爆料：mRNA癌症疫苗训练免疫“灭癌”，肺癌、胰腺癌、肠癌等三年生存率翻倍
　　据“福克斯新闻(foxnews)”2025年10月23日报道，由德克萨斯大学MD安德森癌症中心主导、佛罗里达大学参与的新研究显示：接受免疫检查点抑制剂治疗的癌症患者，若在治疗开始后100天内接种mRNA新冠疫苗，其三年生存率是未接种者的近两倍。
　　该研究结果已于2025年10月19日在柏林举行的欧洲肿瘤内科学会(ESMO)大会(摘要LBA54)公布，并同步发表于《自然》杂志。研究人员表示，mRNA新冠疫苗可训练免疫系统清除癌症，与免疫检查点抑制剂结合能产生强效抗肿瘤反应。
这个“mRNA新冠疫苗”应该主要产生新冠病毒抗原。而对宿主（病人）免疫系统的激活能力新冠病毒抗原（不是活病毒）肯定不如异体淋巴细胞，因为后者可引发移植物抗宿主反应（GVHR），严重的GVHR可致死。

现在各种昂贵的生物疗法声称使癌症成为一种慢性病，但老百姓如何承受得起这慢漫的医疗费

供者淋巴细胞输注
异基因造血细胞移植(HCT)后给予供者淋巴细胞输注(DLI)在诱导或维持移植物抗白血病免疫方面的附加价值无可争议，已成为预防性、抢先（pre-emptive）性或治疗性免疫治疗的常见做法。然而，与异基因HCT一样，各中心均有自己的DLI惯例和实践，且仍存在许多问题（包括最佳应用和毒性、DLI诱导的肿瘤免疫的免疫生物学）。
作为欧洲血液和骨髓移植学会（EBMT）实践协调和指南委员会及细胞治疗和免疫生物学工作组工作的一部分，一个具有移植免疫学和细胞治疗临床和转化知识的专家小组于2023年9月在法国里尔举行了为期两天的研讨会，制定了一组基于共识的建议，用于指导血液恶性肿瘤异基因 HCT 后应用DLI。鉴于大多数报道缺乏前瞻性数据，这些建议主要基于回顾性研究和专家共识。
（笔者注：供者淋巴细胞就是异体淋巴细胞；输注指静脉输注）

如果肿瘤较大，可先用氩氦超冷刀、伽马刀或手术切除使肿瘤负荷尽量减小，然后再用本法（可多次进行）以清除残余癌细胞。

出现排异反应或GVHD是有疗效反应，不必太担忧。GVHD可用糖皮质激素、抗过敏药或抗胸腺细胞球蛋白等对症处理，然后调整减少白细胞局部注入量或延长间歇时间，维持在适度或临界GVHD。

还可将异体白细胞（主要是淋巴细胞）在体外与灭活的癌细胞（或白血病细胞）混合培养一段时间，使异体淋巴细胞被癌细胞（白血病细胞）抗原激活，再移植到患者实体瘤局部或静脉输注给白血病患者。，