小鼠海马组织取材
一、麻醉与安乐死麻醉方法：采用腹腔注射氯胺酮（100 mg/kg）或苯巴比妥（1%）实现深度麻醉。安乐死：确认麻醉生效后，可通过颈椎脱位或断头法处死动物。二、开颅与脑组织取出1.头部固定：将小鼠仰卧位固定于手术台，酒精消毒头部皮肤。2.剪开头皮：沿中线剪开头部皮肤，暴露颅骨。3.颅骨切开：使用精细剪刀或骨钳小心剪开颅骨，暴露全脑。4.取出全脑：用弯镊轻柔分离脑组织与颅骨连接，将全脑转移至预冷的生理盐水中清洗。三、海马组织分离1.脑冠状切面定位：在冰上操作，将脑组织置于滤纸上，辨识海马所在区域（通常位于大脑半球内侧，呈弯曲带状结构）。2.精细剥离：使用显微镊和眼科剪，沿侧脑室下缘逐步分离海马组织，注意避免挤压或机械损伤。四、组织处理固定：将分离的海马组织浸入4%多聚甲醛溶液中固定24小时。脱水与包埋：梯度酒精脱水后，石蜡包埋，制备切片（厚度5 μm）。冷冻保存（可选）：若需后续分子实验，可将组织速冻于液氮，保存于-80℃冰箱。五、注意事项1.操作速度：从处死到组织固定需在15分钟内完成，避免组织自溶。2.低温环境：分离过程保持冰上操作，减少酶活性对组织的破坏。3.器械消毒：所有手术器械需高压灭菌，避免微生物污染。4.个体差异：不同品系小鼠脑部解剖结构存在细微差异，需预先熟悉目标品系特征
一、麻醉与安乐死麻醉方法：采用腹腔注射氯胺酮（100 mg/kg）或苯巴比妥（1%）实现深度麻醉。安乐死：确认麻醉生效后，可通过颈椎脱位或断头法处死动物。二、开颅与脑组织取出1.头部固定：将小鼠仰卧位固定于手术台，酒精消毒头部皮肤。2.剪开头皮：沿中线剪开头部皮肤，暴露颅骨。3.颅骨切开：使用精细剪刀或骨钳小心剪开颅骨，暴露全脑。4.取出全脑：用弯镊轻柔分离脑组织与颅骨连接，将全脑转移至预冷的生理盐水中清洗。三、海马组织分离1.脑冠状切面定位：在冰上操作，将脑组织置于滤纸上，辨识海马所在区域（通常位于大脑半球内侧，呈弯曲带状结构）。2.精细剥离：使用显微镊和眼科剪，沿侧脑室下缘逐步分离海马组织，注意避免挤压或机械损伤。四、组织处理固定：将分离的海马组织浸入4%多聚甲醛溶液中固定24小时。脱水与包埋：梯度酒精脱水后，石蜡包埋，制备切片（厚度5 μm）。冷冻保存（可选）：若需后续分子实验，可将组织速冻于液氮，保存于-80℃冰箱。五、注意事项1.操作速度：从处死到组织固定需在15分钟内完成，避免组织自溶。2.低温环境：分离过程保持冰上操作，减少酶活性对组织的破坏。3.器械消毒：所有手术器械需高压灭菌，避免微生物污染。4.个体差异：不同品系小鼠脑部解剖结构存在细微差异，需预先熟悉目标品系特征
