生物吧 关注:430,400贴子:1,739,304
  • 1回复贴,共1

求大佬帮助我

只看楼主收藏回复

AHAs酶,又叫乙酰乳酸合酶也叫乙酰羟基酸合酶,目前它的测定是加入底物丙酮酸37摄氏度反应30分钟后,产生的产物叫乙偶姻,加入硫酸终止反应,然后65摄氏度进行脱羧15分钟,再加肌酸萘酚65摄氏度15分钟,在这15分钟里产生有色物质,根据有色物质的量来算酶的比活性。
有色物质的量用乙偶姻标准品的浓度曲线对应的吸光度曲线来算,有色物质的量也就是乙偶姻的生成量。因为乙偶姻标准品在酶生成乙偶姻这一步后同步反应。
我的疑问就是,这个咋测量酶动力学km呢,这个酶活测定这么多步,又不是一步就能产生吸光度值变化的。。。。。。。文献里也一笔带过,不懂


IP属地:湖北来自Android客户端1楼2023-11-22 21:21回复
    我不是专业的。
    km的测定应该是通过测定二分之一最大反应速率来得到的吧?
    通过比色法能测得的是酶活性,用不同浓度的底物通过比色法找到底物饱和时的最大反应速率,建立底物浓度与反应速率的曲线,通过曲线找到二分之一最大反应速率对应的底物浓度,然后计算km。
    不应该是这样吗?


    IP属地:黑龙江来自Android客户端2楼2023-11-23 01:25
    回复