四、基本操作过程
1、检查废液收集瓶空间是否够用,检查系统是否连接完成(各个组件、电脑、打印机等)。
2、配制5%甲醇溶液,滤过,超声至少15分钟,再接入系统中,观察5%甲醇溶剂瓶中无析出、沉淀及浑浊等现象后,开始下一步操作。
注意:过滤时选用0.45微米孔径有机滤膜(又称油膜)。
3、打开排气阀,然后开机排气至少5分钟,再把流速调节为0,关闭排气阀。
注意:如果未打开排气阀直接开机或者在较高流速关闭排气阀,就会瞬间产生较高压力,损伤色谱柱!!!
4、调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为1.0开始冲洗系统残留盐分并清洗进样系统或进样阀。
注意:逐步调节(升高或降低均包括,下同),防止压力变化过大损伤色谱柱。
5、在冲洗系统的同一时间里,按照标准配制流动相,滤过,超声至少15分钟后备用。
注意:过滤时根据流动相成分选择适宜的滤膜,含有有机溶剂或者纯有机溶剂的均选用0.45微米孔径有机滤膜(又称油膜),其余均选用0.45微米孔径无机滤膜(又称水膜)。
6、1.0流速冲洗至少20分钟后调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0,再将流动相接入系统中,观察流动相溶剂瓶中无析出、沉淀及浑浊等现象后,开始下一步操作。
7、调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为1.0开始平衡系统。
8、在平衡系统的同一时间里,按照标准配制对照品呵样品(至少三次进样量),滤过,备用。
注意:稳定性差的对照及样品要配制后立即进样。
9、1.0流速平衡系统至少30分钟后,查看显示器基线是否平直,如果平直就可以进样分析了。
10、进样分析结束后,调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0。
11、接入5%甲醇溶液后调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为1.0开始冲洗系统残留盐分并清洗进样系统或进样阀。
12、在冲洗系统的同一时间里,配制65%甲醇溶液,滤过,超声至少15分钟后备用。
13、1.0流速冲洗至少20分钟后调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0,再将65%甲醇溶液接入系统中,观察65%甲醇溶液溶剂瓶中无析出、沉淀及浑浊等现象后,开始下一步操作。
14、调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为1.0开始封存色谱柱。
15、1.0流速封存至少20分钟后调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0,关机。
说明:上述高效液相操作步骤拆分较详细,目的是争取新手在整个操作过程中少出现错误,可以说这部分培训内容才是这个系列培训的真正开始。
1、检查废液收集瓶空间是否够用,检查系统是否连接完成(各个组件、电脑、打印机等)。
2、配制5%甲醇溶液,滤过,超声至少15分钟,再接入系统中,观察5%甲醇溶剂瓶中无析出、沉淀及浑浊等现象后,开始下一步操作。
注意:过滤时选用0.45微米孔径有机滤膜(又称油膜)。
3、打开排气阀,然后开机排气至少5分钟,再把流速调节为0,关闭排气阀。
注意:如果未打开排气阀直接开机或者在较高流速关闭排气阀,就会瞬间产生较高压力,损伤色谱柱!!!
4、调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为1.0开始冲洗系统残留盐分并清洗进样系统或进样阀。
注意:逐步调节(升高或降低均包括,下同),防止压力变化过大损伤色谱柱。
5、在冲洗系统的同一时间里,按照标准配制流动相,滤过,超声至少15分钟后备用。
注意:过滤时根据流动相成分选择适宜的滤膜,含有有机溶剂或者纯有机溶剂的均选用0.45微米孔径有机滤膜(又称油膜),其余均选用0.45微米孔径无机滤膜(又称水膜)。
6、1.0流速冲洗至少20分钟后调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0,再将流动相接入系统中,观察流动相溶剂瓶中无析出、沉淀及浑浊等现象后,开始下一步操作。
7、调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为1.0开始平衡系统。
8、在平衡系统的同一时间里,按照标准配制对照品呵样品(至少三次进样量),滤过,备用。
注意:稳定性差的对照及样品要配制后立即进样。
9、1.0流速平衡系统至少30分钟后,查看显示器基线是否平直,如果平直就可以进样分析了。
10、进样分析结束后,调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0。
11、接入5%甲醇溶液后调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为1.0开始冲洗系统残留盐分并清洗进样系统或进样阀。
12、在冲洗系统的同一时间里,配制65%甲醇溶液,滤过,超声至少15分钟后备用。
13、1.0流速冲洗至少20分钟后调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0,再将65%甲醇溶液接入系统中,观察65%甲醇溶液溶剂瓶中无析出、沉淀及浑浊等现象后,开始下一步操作。
14、调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为1.0开始封存色谱柱。
15、1.0流速封存至少20分钟后调节流速为0.8,待系统压力稳定再调节流速为0.5,待系统压力稳定再调节流速为0.2,待系统压力稳定再调节流速为0,关机。
说明:上述高效液相操作步骤拆分较详细,目的是争取新手在整个操作过程中少出现错误,可以说这部分培训内容才是这个系列培训的真正开始。