直接将供者的淋巴细胞输注（DLI）给白血病移植后复发的患者已经有一定的疗效。最初的工作是Komori（1989）对一例急性淋巴细胞白血病（ALL）患者骨髓移植后复发而进行的。采用供者淋巴细胞体外用IL-2激活，输注后再次缓解。以后的实验发现，DLI不需IL-2激活就可以得到类似的结果。DLI对不同类型的白血病治疗效果不同，移植后复发的慢性粒细胞白血病(CML)效果最好，而ALL最差；CML的Ph染色体消失，达到遗传学缓解可达70％，而ALL不到20％。直接将供者的淋巴细胞输入白血病患者已经有肯定的疗效，防止移植后白血病复发做DLI已经有大量报道。对肾癌等其他肿瘤直接输注淋巴细胞取得疗效也有较多报道。DLI的问题是需要输注大量供者淋巴细胞（>10e10），而异基因淋巴细胞输注后会引起严重的排斥反映，造成移植物抗宿主病（GVHD）。因此最近在治疗方案上有许多改进。从大剂量单次方案到分次逐渐提高剂量的方案。输注剂量从<1-5x10e7/kg开始，逐渐提高每次输注的数量。如果4周后没有GVHD发生，也无明显的骨髓抑制，再开始下一次DLI。出现II度以上GVHD或者获得白血病临床缓解可停止DLI。血液学缓解多出现在6－8周，而细胞遗传学缓解多在3个月。DLI的缺陷是输注的供者淋巴细胞缺乏特异性。CIK（Cytokine-induced killer ）细胞免疫治疗的细胞也来源于患者的外周血单个核细胞，是在IFNγ，IL-2，IL-1，抗-CD3McAb等细胞因子的作用下得到的以CD3+/CD56+细胞为主的混合细胞，许多在体内外实验和临床治疗观察证实其有明显的杀伤肿瘤细胞的作用。体外大量扩增特异性的能够识别肿瘤的细胞毒T细胞(CTL)做免疫治疗更引人注目。

最初见效的轨迹免疫治疗是从对EB病毒相关性淋巴瘤的治疗开始的，Roskrow等在EB病毒阳性的淋巴瘤患者体内刺激抗EB病毒蛋白特异性的淋巴细胞，13例患者中有９例患者获得阳性的结果，其中有３例患者来源的CTL细胞被输注回患者体内，在体内持续了13个月的时间而始终保持着杀伤肿瘤的效果。特异性细胞免疫治疗最近在黑色素瘤的临床实验中取得了令人鼓舞的成果, Dudley等在Rosenberg的实验室，对13例晚期转移并且对常规化疗无效的复发难治黑色素瘤患者进行过继免疫治疗，获得了50%的反应率，最长的一例持续24个月后仍无肿瘤复发迹象。获得这些突破性进展的关键是获得肿瘤特异性的，能够被MHC-I,MHC-II分子识别的肿瘤抗原；体外培养和扩增获得大量特异性CTL细胞；输注化疗或者骨髓移植治疗进行淋巴细胞清除，给转移的细胞提供了持续增殖的空间，维持持久的免疫反应。我们用特异性抗原肽刺激，用DC细胞加强抗原呈递作用，组合细胞因子建立高效稳定的体外淋巴细胞培养体系，最终获得了特异性的T细胞。对同种异体造血干细胞移植后病毒感染性疾病的免疫治疗取得了肯定的效果，淋巴细胞的来源包括HLA配型相近的供者或者自身的淋巴细胞。治疗方法是将采集的淋巴细胞体外修饰，加入特异性抗原和细胞因子刺激，筛选并大量扩增具有高度肿瘤或者病毒特异性的杀伤性T淋巴细胞，然后回输到患者体内。

细胞治疗的关键是：确定肿瘤特异性的，能够被MHC-I,MHC-II分子识别的肿瘤抗原；体外培养和扩增获得大量特异性CTL细胞。我们实验一批抗原：EBV病毒以及CMV抗原混合肽，白血病融合基因bcr/abl ，PML/RARa ， npm1，淋巴瘤表面抗原： Ig 独特型抗原；移植后供受者不同的次要组织相容抗原：ACC1 HA1，。由于不同多肽序列和限定的HLA分子结合，需要给不同HLA患者设计抗原肽。
淋巴瘤是淋巴细胞克隆性扩张所致，B细胞抗原受体IgHV的独特型分子标记也是淋巴瘤的肿瘤特异性抗原。这些独特型分子上的抗原肽（T细胞表位）可以作为CTL免疫反应的抗原靶位，抑制恶性克隆增殖。我们首次在B淋巴瘤亚基因家族的IgHV的框架区上找到了一些其编码的高亲和力的抗原肽，属于B细胞淋巴瘤独特型分子上重要的Ｔ细胞表位。利用生物信息学系统预测抗原性，然后合成抗原9肽做抗原性验证。（Cancer Immunol Immunother. 2005 Nov;54(11):1106-14.）。包括检测患者的HLA类型，应用目前常用的两个抗原表位预测系统（http://syfpeithi.bmi-heidelberg.com和http://bimas.dcrt. nih. gov/molbio/hla_bind/）预测与患者HLA类型匹配的PML-RARa融合肽显性表位，选取高积分9－10肽作为抗原肽。

DC（Dendritic cell）细胞是专职进行抗原递呈的细胞,能够分泌大量的细胞因子,在刺激和扩增特异性的T细胞。以DC细胞为策略的抗肿瘤免疫治疗已经在乳腺癌、黑色素瘤、前列腺癌、血液系统肿瘤中取得了明显的效果。我们用DC的策略主要有以下几种:a. 将肿瘤细胞和DC细胞融合；b. 将DC细胞和抗原肽、肿瘤细胞裂解产物、凋亡的肿瘤细胞等共同培养；c. 将编码肿瘤抗原或某些细胞因子的DNA或是RNA转入DC细胞中；d. 通过特定细胞因子的刺激使肿瘤细胞分化为APC细胞，增加肿瘤细胞的免疫原性。在流式细胞仪上检测培养后的BMDC的成熟标志：CD80，CD83，CD86，HLA DR。加入成熟因子后骨髓DC成熟，成熟标志分子高表达。
目前已经成功治疗肿瘤30余例，最为有效的就是移植后淋巴细胞增殖病，噬血细胞综合症，还包括一些白血病和胃癌等。为迄今用特异性淋巴细胞治疗肿瘤的最多的有效病例。

我们同时实验确定患者细胞中的特异性淋巴细胞克隆，确定其淋巴细胞表面的TCR，实验转TCR基因治疗的可能性。培养和鉴定特异性细胞毒T细胞的TCR受体的方法包括，T细胞受体基因扫描（gene scan)；T细胞受体基因谱型图（Spectrotyping)；抗TCR BV的单克隆抗体分离特异T细胞克隆；实验T细胞γ-干扰素分泌水平，用FATAL；HLA/epitope /Pentamer (tetramer)实验了解T细胞杀伤功能。T细胞受体基因扫描和T细胞受体基因谱型图是利用T细胞表面的T细胞受体（TCR）基因重排特征建立的，切割谱型图上的TCR基因做序列分析。这些方法使我们找到一批肿瘤和白血病相关的T细胞克隆的TCRBV CDR3：如白血病相关的TCRBV CDR3  SAAWGLAINEQF；ASSSAGVTLNTEA；ASSLAGSREYFGPG；ASSDVPSSTMSSS 等。利用蛋白质三维结构模拟软件GENO3D，模拟培养的T细胞克隆TCRBV CDR3空间结构，确定“环”上与肽直接接触的3～4个氨基酸(motif)。（http://pbil.ibcp.fr/htm/ index.php），即白血病相关T细胞克隆的TCR BV蛋白构象。利用这些motif设计引物，用荧光定量PCR确定患者相应CTL克隆的变化。用荧光HLA/九肽四聚体检测发现，肿瘤抗原肽3次刺激正常人外周血淋巴细胞，培养3周后，肽特异性CTL细胞数量增加，成为优势克隆。利用细胞毒实验分组证实：经负载抗原肽的DC刺激3次后，T细胞对于淋巴瘤或者白血病细胞的反应性明显提高，γ-干扰素分泌水平显著高于培养前以及无刺激组。

用转基因技术有可能修饰普通淋巴细胞使其成为特异性CTL细胞。我们分别利用amaxa nucleofection 基因转导系统和基因枪，将抗肿瘤的TCR导入淋巴细胞。通过将识别特异性抗原肽的TCR序列克隆到基因载体，转染正常T细胞,培养并扩增，获得了能够识别肿瘤特异性抗原肽的转基因CTL细胞克隆。
 
总之，用EB相关抗原肽刺激供者或者患者本人的T细胞，可以大量产生针对EB病毒相关疾病和移植后淋巴细胞增殖病的CTL克隆，有可能用转基因获得转基因淋巴细胞克隆治疗白血病和其他肿瘤。

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