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我们自己纯化的Taq酶用在普通PCR效果很好,酶活都很高,但是做荧光定量,加入sybr green后一点扩增都没有,请问普通的taq酶没法用于荧光定量PCR吗?


1楼2020-03-23 14:12回复
    荧光PCR对Taq的要求与普通的对比没那么大的差别,普通能扩的很好,拿到荧光PCR再差也不会什么都没有,关键是看你的染料是不是加多了,SYBR里面的DMSO是会抑制反应的,一定注意好的用量


    2楼2020-03-24 08:34
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      2026-04-22 14:24:39
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      PCR循环包括变性(90 °C左右)、退火(50°C左右)、延伸(70°C左右),每一步对温度的要求都不一样,多数酶在高温时即变性失活,但是BIOG Taq酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,所以不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷。同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。


      3楼2020-04-01 11:43
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