
deman降解法是蛋白n端测序分析中非常成熟的方法之一,有着广泛的应用。Edman降解法可对纯化后蛋白产物、抗体以及蛋白疫苗进行N端测序。
Edman降解法测序反应包括三步:第一步碱性条件下,PITC与蛋白N端的游离氨基结合;第二步是在酸性溶液中,N端残基被切除;第三步是PITC结合的残基转化成为更为稳定的PTH残基,经过在线的HPLC分析,根据洗脱时间确定氨基酸种类。
Edman降解法常应用领域:蛋白表达产物的验证、细胞株建立和发酵过程中蛋白产物的验证、蛋白降解/酶切分析、 De-novo测序。