判断依据1，扩增曲线理论上PCR过程中反应产物是以指数增长的，但随着PCR循环数的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反应副产物阻碍反应等原因，致使PCR的扩增效率降低，产物生成的速度逐渐减缓，因此扩增曲线是一条“S形”曲线。判断依据2，Ct值在合理范围内Ct值是判断实验成功与否的重要参考。CT值应该在合理的范围内，一般来说，CT 值应该在 15-35 之间，且复孔间的曲线重复性好。判断依据3，溶解曲线熔解曲线是判断qPCR检测中是否具有非特异性扩增的重要指标。溶解曲线应该呈现单峰，峰的宽度较小，这表明扩增是具有特异性的。如果出现多个峰或非特异性扩增，数据可能不可用。判断依据4，标准曲线标准曲线的线性范围应当涵盖所有实验样本的浓度范围。标准曲线的R²值应接近1，通常要求R² ≥ 0.99。根据标准曲线的一些参数可以判断荧光定量 PCR 体系的优劣。
